多巴胺通过电针介导坐骨神经的免疫调节
脓毒症是非冠状动脉重症监护病房的主要死亡原因，每年造成超过,名患者死亡，占美国总死亡的9.3％。近期研究表明，迷走神经控制炎症并预防致死性实验败血症。然而，迷走神经的临床意义受到麻醉剂和直接神经刺激所需手术的限制。本文使用电针作为迷走神经刺激的替代手段。电针通过坐骨神经、迷走神经和肾上腺的儿茶酚胺来控制败血症的系统性炎症，通过对多巴胺受体激动剂和催化物的调节多角度证明多巴胺的抗炎功能，最终证实由坐骨神经和迷走神经介导的调节肾上腺中儿茶酚胺产生的新型抗炎机制。
——编者按
FIG1
电针通过坐骨神经、迷走神经和肾上腺的儿茶酸来控制败血症的系统性炎症。
(a-d)成人C57BL/6雄性小鼠接受LPS和sham或电针治疗(EA)。血清细胞因子水平的肿瘤坏死因子(a),MCP1(b)、白细胞介素6(c)和INFγ(d)分析了post-LPS在表示时间点。(e)小鼠在LPS挑战和sham或电针(EA)之前，接受了普通腓骨(PSX)、胫骨(TSX)或坐骨神经(SSX)72h的手术切除(控制)或手术神经切除。*P0.01vsLPS(n=3/组;在LPS注射之前，学生t检验)(f)实验鼠在15分钟内接受了假或坐骨神经刺激(scn)。（g）小鼠在LPS注射和随后的假手术或电针（EA）前3天进行了假手术（控制）、横膈膜迷走神经切术（sVX）72h或脾切除术（SPX）。(h)未经治疗的动物(血液)的血液补充了50%的血清，这些动物是在sham(EA)或肾上腺切除(ADX/EA)小鼠中接受假(控制)或电针治疗的。上嵌板代表细胞存活，由MTT法测定。(t检验和ADX/EA)。(i)在电针(EA)之前，小鼠进行了控制、手术肾上腺切除术(ADX)，或用利血平治疗。(j)多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)或肾上腺素(E)均在对照组或肾上腺切除(ADX)小鼠的血清中进行。TNF在血清中为90分钟，在条件培养基中为min。*P0.01(n=4/组;Bonferroni修正的单向的方差分析。）
FIG2
电针诱导DOPA脱羧酶和多巴胺的表达
（a）使用电灸在具有膈下迷走神经切断术（EA+sVX），迷走神经刺激（VNS）的动物或针对α7nAChR-敲除（EA-7KO）小鼠的电针中在血清C57BL/6小鼠中分析儿茶酚胺。ND=未检测到（b）在C57BL/6小鼠（对照），α7nAChR-敲除（α7KO）小鼠，β2肾上腺素受体-敲除（β2KO）小鼠或用镰孢酸（40mg/kg）处理的C57BL/6小鼠中分析血清TNF水平(40mgkg?1;i.p.)和电针治疗（EA）。（c）在体外用LPS和指定浓度的去甲肾上腺素（NE）处理来自野生型（WT）或β2肾上腺素受体-敲除（β2KO）小鼠的血液。（d）小鼠接受富马酸（40mgkg-1;ip），并在假手术后15分钟后分析假手术或电针（EA）和血清儿茶酚胺水平。（e）收集来自接受假（S）或电针（EA）的成年C57BL/6雄性小鼠的肾上腺，并通过蛋白质印迹分析DOPA脱羧酶（DDC）和多巴胺β-羟化酶（DβH）表达。使用β-肌动蛋白作为参照。这张图描述了实验样品的密度测量与对照组相比的相对值。在所有实验中*P0.01与Sham（S）（n=3/组;学生的t检验）。（F）分析来自假手术或电针（EA）的小鼠的肾上腺对DOPA脱羧酶（DDC）或多巴胺β-羟化酶（DβH）的免疫染色。（g）来自经受对照或电针（EA）的小鼠的肾上腺对磷酸化神经丝（NF-P;绿色）染色或磷酸化神经丝（NF-P;绿色）和多巴脱羧酶（DDC;红色）双染色。三张图片代表三个不同的实验。条带表示μm。
FIG3
电针“拯救”小鼠于已成模的多菌性腹膜炎
（AC）成人C57BL/6雄性小鼠接受假或电（EA）中的内毒素攻击后右开始（LPS;12毫克千克-1;IP）。（a）在Kaplan-Meier分析中存活（n=20/组，*P0.01生存对数轶检验与对照）。（b）发病率和（c）体重改变用平均值±SE表示。*P0.01（n=6/组;使用Bonferroni修正的单向方差检验）。所有小鼠接受CLP和假电针或电针（EA）开始（d）15分钟前或（e）在CLP后24小时。除了第一次治疗外，所有动物在接下来的两天内每天接受15分钟的假电针或电针。Kaplan-Meier分析显示生存率（n=15/组，*P0.05生存生存对数轶检验vs.对照）。（f）小鼠在CLP之前接受手术肾上腺切除术（ADX），随后进行假手术或电针（EA，每天一次，连续3天）。生存以Kaplan-Meier分析表示（n=20/组，*P0.05生存对数轶检验）。
FIG4
电针诱导DOPA脱羧酶和多巴胺的表达
（a）使用电灸在具有膈下迷走神经切断术（EA+sVX），迷走神经刺激（VNS）的动物或针对α7nAChR-敲除（EA-7KO）小鼠的电针中在血清C57BL/6小鼠中分析儿茶酚胺。ND=未检测到（b）在C57BL/6小鼠（对照），α7nAChR-敲除（α7KO）小鼠，β2肾上腺素受体-敲除（β2KO）小鼠或用镰孢酸（40mg/kg）处理的C57BL/6小鼠中分析血清TNF水平(40mgkg?1;i.p.)和电针治疗（EA）。（c）在体外用LPS和指定浓度的去甲肾上腺素（NE）处理来自野生型（WT）或β2肾上腺素受体-敲除（β2KO）小鼠的血液。（d）小鼠接受富马酸（40mgkg-1;ip），并在假手术后15分钟后分析假手术或电针（EA）和血清儿茶酚胺水平。（e）收集来自接受假（S）或电针（EA）的成年C57BL/6雄性小鼠的肾上腺，并通过蛋白质印迹分析DOPA脱羧酶（DDC）和多巴胺β-羟化酶（DβH）表达。使用β-肌动蛋白作为参照。这张图描述了实验样品的密度测量与对照组相比的相对值。在所有实验中*P0.01与Sham（S）（n=3/组;学生的t检验）。（F）分析来自假手术或电针（EA）的小鼠的肾上腺对DOPA脱羧酶（DDC）或多巴胺β-羟化酶（DβH）的免疫染色。（g）来自经受对照或电针（EA）的小鼠的肾上腺对磷酸化神经丝（NF-P;绿色）染色或磷酸化神经丝（NF-P;绿色）和多巴脱羧酶（DDC;红色）双染色。三张图片代表三个不同的实验。条带表示μm。
此前，对脓毒症的抗炎策略在临床试验中疗效有限，部分原因是它们针对的是单个细胞因子，而实验模型未能模拟临床环境。神经网络是由进化所选择的生理机制来控制炎症，而炎症可以用来治疗炎症和感染性疾病。在此，我们报道了用电针治疗坐骨神经的神经活动控制全身炎症，并从多菌性腹膜炎中拯救小鼠。电针在坐骨神经控制系统炎症通过诱导迷走神经激活多巴脱羧酶导致多巴胺在肾上腺髓质的产生。实验模型:肾上腺切除的动物模拟临床肾上腺缺失，增加脓毒症的易感性，并预防电针的抗炎作用。多巴胺通过多巴胺能-1受体抑制细胞因子的产生。多巴胺能d1-激动剂抑制全身炎症，并在肾上腺机能不全的动物中，从多菌性腹膜炎中拯救小鼠。本实验结果表明，由坐骨神经和迷走神经调节的一种新型的抗炎机制可以调节肾上腺的儿茶酚胺的产生。从药理学的角度来看，选择性多巴胺能激动剂可以模拟电针的抗炎作用，并能提供治疗优势，以控制感染性和炎症性疾病的炎症。
文献来源：Torres-RosasR,YehiaG,Pe?aG,etal.Dopaminemediatesvagalmodulationoftheimmunesystembyelectroacupuncture[J].CriticalCare,,18(S2):P54.
thanksforreading~
李牧洋陈波赞赏
